Atrial Natriuretic Factor (1-30) (frog) ;APRSMRRSSDCFGSRIDRIGAQSGMGCGRF

一、基本信息

  • 英文全称:Atrial Natriuretic Factor (1-30) (frog)
  • 中文全称:蛙源心房利钠因子片段 (1–30)(蛙 ANF 1-30)
  • 释义:蛙心房利钠肽(ANF),两栖类利钠肽家族成员,区别于人、啮齿类 ANP 序列;(1-30) 为全长成熟活性多肽。
  • 三字母序列:Ala-Pro-Arg-Ser-Met-Arg-Arg-Ser-Ser-Asp-Cys-Phe-Gly-Ser-Arg-Ile-Asp-Arg-Ile-Gly-Ala-Gln-Ser-Gly-Met-Gly-Cys-Gly-Arg-Phe
  • 单字母序列APRSMRRSSDCFGSRIDRIGAQSGMGCGRF
  • 氨基酸总数:30 aa
  • 分子式:C131H217N49O41S4
  • 分子量:3262.72
  • 结构修饰说明
  1. 线性多肽,无 N 端焦谷氨酸、生物素修饰,无 C 端酰胺;
  2. 分子内二硫键:Cys¹¹ ↔ Cys²⁷,利钠肽保守环状结构,是受体识别核心;
  3. 序列含有2 个 Met;与人、大鼠 Atriopeptin 家族氨基酸组成差异大,物种特异性显著。
  • 结构式

二、理化性质

1.紫外定量:含 Phe,280 nm 有紫外吸收,可分光光度法定量;无 Tyr、Trp;

2.稳定性要点

  • Cys11/Cys27 形成二硫键,体系严禁 DTT、β- 巯基乙醇等还原剂,开环后活性丧失;
  • 含 2 个 Met,极易氧化失活;溶解、分装全程冰浴,缩短敞口暴露空气;长期冻干粉充氮气隔氧保存;
  • Phe 为光敏残基,全程避光操作;
  • 两端无末端封闭修饰,易被肽酶降解,活性实验工作液现配现用;

3.电荷特性
酸性残基:Asp;大量碱性 Arg;整体偏弱碱性;适配 pH 6.0–7.4 PBS、两栖类心肌、血管组织缓冲体系;

4.溶解性
Ser、Gln 亲水残基搭配带电氨基酸,中性缓冲液常温可完全溶解;

5.空间构象
二硫键约束形成特征大环结构,环区负责利钠肽受体结合,两侧延伸序列调控亲和力与代谢稳定性。

三、生物学背景

蛙 ANF (1-30) 由蛙心房肌合成释放,属于两栖类利钠肽系统信号分子,作用于利钠肽受体(NPR),激活 cGMP 通路;仅适用于蛙相关体外 / 体内实验,不能直接套用哺乳动物 ANP 实验结论。

四、生物学功能

  1. 激动利钠肽受体,介导血管舒张、利钠利尿、调节水盐平衡;
  2. 抑制醛固酮分泌,调控两栖类渗透压稳态;
  3. 参与两栖动物心血管调节、渗透压适应生理过程。

五、科研应用

  1. 蛙心肌、血管组织利钠肽受体结合、cGMP 生成检测;
  2. 两栖动物渗透压调节、心血管进化生物学研究;
  3. 脊椎动物利钠肽家族跨物种序列、功能构效对比;
  4. 利钠肽受体药理学、激动剂筛选基础研究。

六、溶解与储存规范

  1. 溶解:pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制,禁止添加还原剂,减少敞口时间防止 Met 氧化、二硫键断裂;
  2. 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;
  3. 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光存放不超过 3 天,功能实验现配现用。